Detection and genotyping of equid herpesvirus 1 in Uruguay.

Abstract: Infection with equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) causes respiratory disease, abortion and neurological disorders in horses. Molecular epidemiology studies have demonstrated that a single nucleotide polymorphism (A2254/G2254) in the genome region of open reading frame 30 which results in an amino acid variation (N752/D752) of the EHV-1 DNA polymerase, is significantly associated with the neuropathogenic potential of naturally occurring strains. In recent years, an increase in the number of cases of equine neurological disease caused by neuropathogenic variants of EHV-1 has been observed in numerous countries. The purpose of this study was to detect the presence of the viral genome of EHV-1 and equid herpesvirus 4 (EHV-4) in the bronchopulmonary lymph nodes of 47 horses from various locations in Uruguay, obtained from a slaughterhouse, and to determine whether the EHV-1 genomes possessed the mutation associated with neuropathogenesis (G2254/D752). The genes encoding glycoprotein H (gH) of EHV-1 and glycoprotein B (gB) of EHV-4 were amplified by a semi-nested polymerase chain reaction. Of the samples analysed, 28% and 6% of lymph nodes contained the genes for gH and gB, respectively. The viral DNA polymerase gene was amplified and sequenced. Twelve of the 13 genomes sequenced presented the nucleotide G2254, while the remaining 1 showed both nucleotides, A2254 and G2254. The results confirm the presence of EHV-1 in Uruguay. Furthermore, there is evidence for the first time of the detection of EHV-4, and high-frequency detection of the neuropathogenic variant (G2254/D752) of EHV-1 in Uruguay. These findings provide new insights into the epidemiological situation of EHV-1 and EHV-4 in that country. L’infection par l’herpèsvirus équin de type 1 (EHV-1, sous-famille des alpha- Herpesvirinae) provoque chez les chevaux des maladies respiratoires, des avortements et des troubles neurologiques. Des études d’épidémiologie moléculaire ont montré une corrélation significative entre la présence d’un polymorphisme nucléotidique simple (A2254 / G2254) dans la région génomique du cadre de lecture ouvert 30 (ORF30), se traduisant par une variation des acides aminés (N752 / D752) de l’ADN polymérase du virus EHV-1, et la neuropathogénicité potentielle des souches présentes sur le terrain. On constate depuis quelques années dans de nombreux pays une augmentation du nombre de chevaux atteints de troubles neurologiques dus aux variants neuropathogènes de l’EHV-1. Les auteurs présentent les résultats d’une étude visant à détecter la présence du génome viral de l’EHV-1 et de l’herpèsvirus équin de type 4 (EHV-4) dans des échantillons de ganglions lymphatiques broncho-pulmonaires de 47 chevaux provenant de diverses régions d’Uruguay, collectés à l’abattoir, et à déterminer si les génomes de l’EHV-1 présentaient la mutation associée avec cette neuropathogénicité (G2254 / D752). Dans un premier temps, une amplification en chaîne par polymérase semi-nichée a permis d’amplifier les gènes codant pour la glycoprotéine H (gH) de l’EHV-1 et la glycoprotéine B (gB) de l’EHV-4. Les gènes gH et gB étaient présents respectivement dans 28 % et 6 % des échantillons de ganglions lymphatiques analysés. Le gène de l’ADN polymérase virale a été amplifié puis séquencé. Au total, 12 des 13 génomes séquencés contenaient le nucléotide G2254 tandis que le treizième génome présentait à la fois les nucléotides A2254 et G2254. Ces résultats confirment la présence de l’EHV-1 en Uruguay. En outre, il s’agit du premier rapport faisant état de la présence de l’EHV-4 et de la fréquence de détection du variant neuropathogénique (G2254 / D752) de l’EHV-1 en Uruguay. Ces résultats apportent un nouvel éclairage sur la situation épidémiologique de l’EHV-1 et l’EHV-4 dans ce pays. La infección por alfa-herpesvirus equino 1 (HVE1) causa en el caballo enfermedades respiratorias, abortos y trastornos neurológicos. Los estudios de epidemiología molecular han demostrado la existencia de una correlación significativa entre el potencial neuropatogénico de cepas presentes en la naturaleza y la presencia de un polimorfismo de nucleótido único (A2254/G2254) en la región genómica del marco abierto de lectura 30 (ORF30). Este polimorfismo se traduce en la variación de un aminoácido (N752/D752) en la ADN-polimerasa del HVE1. En los últimos años se ha observado en muchos países un aumento del número de casos de enfermedad neurológica equina causados por variantes neuropatógenas del HVE1. Los autores describen un estudio encaminado a detectar la presencia de genoma vírico del HVE1 y del herpesvirus equino 4 (HVE4) en ganglios linfáticos broncopulmonares de 47 caballos de varias localidades del Uruguay a partir de muestras obtenidas en mataderos, y a dilucidar después si el genoma de esos HVE1 poseía la mutación ligada a la neuropatogénesis (G2254/D752). En primer lugar se empleó una técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) semianidada para amplificar los genes que codifican la glucoproteína H (gH) del HVE1 y la glucoproteína B (gB) del HVE4. De las muestras de ganglios linfáticos analizadas, los genes de la gH y de la gB estaban presentes, respectivamente, en un 28% y un 6%. Se amplificó y secuenció el gen de la ADN-polimerasa vírica. Doce de los trece genomas secuenciados presentaban el nucleótido G2254, mientras que el restante contenía ambos nucleótidos, A2254 y G2254. Los resultados confirman la presencia del HVE1 en el Uruguay. Además, por primera vez, quedó demostrada la presencia del HVE4, así como la elevada frecuencia de la variante neuropatógena (G2254/D752) del HVE1, en el Uruguay. Estos resultados arrojan nueva luz sobre la epidemiología de los virus HVE1 y HVE4 en el país.